Проект КП-06-Н56/16 – Научни постижения

Бяха създадени ефективни протоколи за размножаване на Sideritis scardica, Clinopodium vulgare и Marrubium vulgare по разработената in vitro технология. Създадени са насаждения от получените ex vitro адаптирани растения, които показаха висока антиоксидантна активност.

Екстрактите предизвикват зависимо от концентрацията и времето на третиране намаляване на клетъчната жизнеспособност и пролиферация на клетки при човешки туморни клетъчни линии (карцином на млечна жлеза, цервикален и колоректален карцином). Най-силно противотуморно действие проявяват екстрактите от C. vulgare и S. scardica, а екстрактите от M. vulgare – по-слабо. Най-висока активност има екстракта, получен от листа на in vitro култивирани C. vulgare. Култивираните S. scardica показват по-силно антитуморно действие, в сравнение с тези от дивите растения. Проведеното флуоресцентно микроскопско изследване установи значителни промени в морфологията и растежа на туморните клетки в сравнение с нетретираните контролни клетъчни култури.

Екстрактите ефективно повлияват Sco-индуцираното увреждане на паметта при експерименталните животни. Ефектът на екстракт от култивирани S. scardica и е по-ясно изразен върху пространствената работна памет, а този на C. vulgare и M. vulgare е върху паметта за разпознаване; показват протективен ефект върху моноаминергичната система, по-ясно изразен в кортекс, силен антиоксидантен ефект и способност да влият върху pCREB/BDNF сигнализацията. Екстрактите от C. vulgare и М. vulgare показват ацетилхолинестеразна инхибиторна активност, а комбинацията от S. scardica + C. vulgare се открои с много силен протективен ефект по отношение на разпознавателната памет и моноаминергичнта система в кортекс и силен антиоксидантен ефект.

Фигура 1. In vitro микроразмножени и култивирани растения: а) Clinopodium vulgare; б) Marrubium vulgare; в) Sideritis scardica.

Фигура 2. Флуоресцентна микроскопия. (А) Апоптогенно действие при клетки от цервикален карцином HeLa. a- контролни нетретирани клетки; b-,с-, d-,e- f– клетки, третирани с екстракт от C. vulgare в различни фази на апоптоза; (Б) Промени в клетъчната и ядрената морфология на клетки от цервикален карцином на HeLa, индуцирани от екстракт, получен от in vitro култивирани S. scardica. a-, c- контролни нетретирани HeLa клетки; b-,d- HeLa клетки, третирани с IVP екстракт; (В) Цитоморфологични промени, индуцирани от екстракта от цветове на in vitro култивирани растения C. vulgare в клетки на колоректален карцином HT-29. a-,c- контролни нетретирани клетки; b-,d- клетки, третирани с екстракт.

Фигура 3. Повeденчески експерименти с гризачи: а) T-maize; б) Hole-board.